<!DOCTYPE html>
<html class="client-nojs vector-feature-language-in-header-enabled vector-feature-language-in-main-page-header-disabled vector-feature-page-tools-pinned-disabled vector-feature-toc-pinned-clientpref-0 vector-toc-not-available vector-feature-main-menu-pinned-disabled vector-feature-limited-width-clientpref-1 vector-feature-limited-width-content-enabled vector-feature-custom-font-size-clientpref-1 vector-feature-appearance-pinned-clientpref-0 skin-theme-clientpref-day vector-sticky-header-enabled" lang="de" dir="ltr"><head>
<meta charset="UTF-8">
<title>Strep-Protein Interaction Experiment</title>
<meta name="viewport" content="width=device-width, initial-scale=1.0">
<link rel="icon" type="image/png" href="./_res_/favicon.png">
<link rel="canonical" href="https://de.wikipedia.org/wiki/Strep-Protein_Interaction_Experiment"> <link href="./_mw_/ext.cite.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.wikimediamessages.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/skins.vector.icons.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/skins.vector.search.codex.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/skins.vector.styles.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<meta name="ResourceLoaderDynamicStyles" content="">
<link href="./_mw_/ext.gadget.citeRef.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.defaultPlainlinks.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiCommonHide.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiCommonLayout.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiCommonStyle.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiDarkmode.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.dewikiResponsive.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link href="./_mw_/ext.gadget.specialSearch.css" rel="stylesheet" type="text/css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_mw_/site.styles.css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_mw_/noscript.css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_res_/footer.css">
<link rel="stylesheet" type="text/css" href="./_res_/vector-2022.css">
</head>
<body class="skin--responsive skin-vector skin-vector-search-vue mediawiki ltr sitedir-ltr mw-hide-empty-elt ns-0 ns-subject page-Strep-Protein_Interaction_Experiment rootpage-Strep-Protein_Interaction_Experiment skin-vector-2022 action-view">
<div class="mw-page-container">
<div class="mw-page-container-inner">
<div class="mw-content-container">
<main id="content" class="mw-body">
<header class="mw-body-header vector-page-titlebar">
<h1 id="firstHeading" class="firstHeading mw-first-heading"><span class="mw-page-title-main">Strep-Protein Interaction Experiment</span></h1>
</header>
<a id="top"></a>
<div id="bodyContent" class="vector-body ve-init-mw-desktopArticleTarget-targetContainer" aria-labelledby="firstHeading" data-mw-ve-target-container="">
<div id="contentSub">
<div id="mw-content-subtitle"></div>
</div>
<div id="mw-content-text" class="mw-body-content mw-content-ltr" lang="de" dir="ltr"><div class="mw-content-ltr mw-parser-output" lang="de" dir="ltr"><p>Das <b>Strep-Protein Interaction Experiment</b> (<b>SPINE</b>) ist eine biochemische Methode zum Nachweis von <a href="Protein-Protein-Interaktion" title="Protein-Protein-Interaktion">Protein-Protein-Interaktionen</a>.
</p>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Eigenschaften">Eigenschaften</h2></div>
<p>Das SPINE ist eine Variante des <a href="Pulldown-Assay" title="Pulldown-Assay">Pulldown-Assays</a>, bei der ein Nachweis des Kontaktes zweier oder mehrerer <a href="Protein" title="Protein">Proteine</a> durch eine <a href="Proteinreinigung" title="Proteinreinigung">Proteinreinigung</a> anhand eines <a href="Protein-Tag" title="Protein-Tag">Strep-Tags</a> an einem bekannten, meist <a href="Rekombinantes_Protein" title="Rekombinantes Protein">rekombinanten</a> Protein. Durch die Reinigung werden die bindenden Proteine mitaufgereinigt. Die Reinigung erfolgt durch <a href="Affinit%C3%A4tschromatographie" title="Affinitätschromatographie">Affinitätschromatographie</a> (z. B. <i>Streptactin</i>) mit einer reversiblen <a href="Vernetzung_(Chemie)" title="Vernetzung (Chemie)">Quervernetzung</a> der <a href="Proteinkomplex" title="Proteinkomplex">Proteinkomplexe</a> durch <a href="Formaldehyd" title="Formaldehyd">Formaldehyd</a> zur <a href="Fixierung_(Pr%C3%A4parationsmethode)" title="Fixierung (Präparationsmethode)">Fixierung</a> der meist vorübergehenden Bindung. Durch Aufkochen der vernetzten Proteinkomplexe in <a href="Probenpuffer" title="Probenpuffer">Probenpuffer</a> wird die Vernetzung aufgehoben. Eine weitere Trennung wird anschließend durch eine <a href="SDS-PAGE" title="SDS-PAGE">SDS-PAGE</a> erzielt. Die Identifikation der bindenden Proteine wird durch einen anschließenden <a href="In-Gel-Verdau" title="In-Gel-Verdau">In-Gel-Verdau</a> und eine Analyse per <a href="Massenspektrometrie" title="Massenspektrometrie">Massenspektrometrie</a> erreicht.<sup id="cite_ref-1" class="reference"><a href="#cite_note-1"><span class="cite-bracket">[</span>1<span class="cite-bracket">]</span></a></sup> Für <a href="Membranprotein" title="Membranprotein">Membranproteine</a> wurde die Methode angepasst, um unspezifische Wechselwirkungen aufgrund des <a href="Hydrophober_Effekt" class="mw-redirect" title="Hydrophober Effekt">hydrophoben Effekts</a> zu mindern.<sup id="cite_ref-2" class="reference"><a href="#cite_note-2"><span class="cite-bracket">[</span>2<span class="cite-bracket">]</span></a></sup><sup id="cite_ref-3" class="reference"><a href="#cite_note-3"><span class="cite-bracket">[</span>3<span class="cite-bracket">]</span></a></sup>
</p>
<div class="mw-heading mw-heading2"><h2 id="Einzelnachweise">Einzelnachweise</h2></div>
<ol class="references">
<li id="cite_note-1"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-1">↑</a></span> <span class="reference-text">C. Herzberg, L. A. Weidinger, B. Dörrbecker, S. Hübner, J. Stülke, F. M. Commichau: <i>SPINE: a method for the rapid detection and analysis of protein-protein interactions in vivo.</i> In: <i>Proteomics.</i> Band 7, Nummer 22, November 2007, S. 4032–4035, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1002/pmic.200700491">10.1002/pmic.200700491</a></span>. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/17994626?dopt=Abstract">PMID 17994626</a>.</span>
</li>
<li id="cite_note-2"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-2">↑</a></span> <span class="reference-text">V. S. Müller, P. R. Jungblut, T. F. Meyer, S. Hunke: <i>Membrane-SPINE: an improved method to identify protein-protein interaction partners of membrane proteins in vivo.</i> In: <i>Proteomics.</i> Band 11, Nummer 10, Mai 2011, S. 2124–2128, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.1002/pmic.201000558">10.1002/pmic.201000558</a></span>. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/21472855?dopt=Abstract">PMID 21472855</a>.</span>
</li>
<li id="cite_note-3"><span class="mw-cite-backlink"><a href="#cite_ref-3">↑</a></span> <span class="reference-text">V. S. Müller, K. Tschauner, S. Hunke: <i>Membrane-SPINE: A Biochemical Tool to Identify Protein-protein Interactions of Membrane Proteins In Vivo.</i> In: <i>Journal of visualized experiments : JoVE.</i> Nummer 81, 2013, <a href="Digital_Object_Identifier" title="Digital Object Identifier">doi</a>:<span class="uri-handle" style="white-space:nowrap"><a rel="nofollow" class="external text" href="https://doi.org/10.3791/50810">10.3791/50810</a></span>. <a class="external mw-magiclink-pmid" rel="nofollow" href="https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/24300168?dopt=Abstract">PMID 24300168</a>.</span>
</li>
</ol></div><!--htdig_noindex--><div><div class="zim-footer">
Dieser Artikel wurde von <a class="external text" title="Zuletzt bearbeitet am 2026-01-02" href="https://de.wikipedia.org/wiki/?title=Strep-Protein_Interaction_Experiment&oldid=262951940">Wikipedia</a> herausgegeben. Der Text ist unter <a class="external text" href="https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0/deed.de">Creative Commons Attribution-Share Alike 4.0</a> verfügbar, sofern nicht anders angegeben. Für die Mediendateien können zusätzliche Bedingungen gelten.
</div>
</div><!--/htdig_noindex--></div>
</div>
</main>
</div>
</div>
</div>
<script src="./_webp_/webpHandler.js"></script>
</body></html>